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【Optiscan应用案例】8. 利用激光共聚焦内窥镜进行移植肠上皮细胞荧光示踪研究

结果:经过研究发现,5-氯甲基荧光素二乙酸酯(5-Chloromethylfluorescein diacetate,CMFDA)是合适的,它可以有效地对所有类器官进行染色,而不会在共培养物中转移到未染色的类器官。同时未发现它对活力,类器官生长或干细胞分化能力的明显不利影响,尽管单细胞播种显示类器官形成效率呈剂量依赖性降低。标记的类器官很容易在体外使用CLE进行至少3天的鉴定,并且在移植到小鼠实验性结肠炎后可以在体外检测到。

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2021.09

【Optiscan应用案例】7.通过共聚焦显微镜验证聚(ADP-核糖)聚合酶1可作为在阴道镜检查过程中识别癌症的潜在分子标志物

该研究描述了PARPi-FL(一种靶向PARP1的荧光显像剂)的使用,PARP1是一种与正常周围组织相比在癌症中过度表达的核酶。我们利用其作为光学成像剂来特异性靶向PARP1表达,与正常的周围组织相比,宫颈癌中PARP1的表达更高。在将其局部应用于新鲜切除的锥形活组织检查后,肿瘤细胞的细胞核发出了特定的荧光信号,可以使用手持式活体共聚焦显微镜将其可视化。这种方法有潜力提高阴道镜检查中肿瘤细胞的体内鉴定,从而实现快速、无创、准确的组织病理学评估。

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2021.09

【Optiscan应用案例】6.通过活体共聚焦显微镜验证PARP1作为口腔癌等的生物标志物的能力(首次在人体研究报道)

。在这篇文章中,作者探索了DNA修复酶PARP1作为成像生物标记物,在动物模型、人体组织中进行了光学成像,并首次作为在人类临床试验中的一部分。我们的数据表明,PARP1是口腔癌、口咽癌和食道癌的定量生物标志物,可通过PARPi-FL(一种荧光标记的小分子造影剂,用于局部或静脉内递送)进行可视化。我们验证了在口腔癌、口咽癌和食道癌中PARPi-FL辅助肿瘤检测的可行性。我们开发了一种用于人类生物样本的同期PARPi-FL局部染色方案。在活检的25分钟内使用新鲜的口腔癌组织,无需终端处理即可正确鉴定肿瘤和边缘样本,其敏感性和特异性均> 95%。PARPi-FL成像可以集成到临床工作流程中,潜在地提供手术边缘是否存在显微镜病变的即时评估。此外,我们首次展示了人类口腔癌中的PARPi-FL成像。总的来说,我们的临床前和临床研究有一个共同的目标,即验证基于PARPi-FL的光学成像在早期检测和术中切缘定位方面的临床价值。

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2021.09

【Optiscan应用案例】5. 激光共聚焦内窥显微镜在神经外科和脑肿瘤荧光素成像技术的细微差异的研究进展

与Gen1相比,Gen2 CLE的优势包括更灵敏、更直观的用户界面、每个图像的元数据收集、自动Z-stack成像、更清晰的图像和无菌保护套。Gen2的缺点是最大成像速度稍慢,视野较小。确定了以FNa作为荧光造影剂显示脑肿瘤细胞结构的最佳Gen2成像参数,以帮助神经外科临床进一步在体内和体外快速使用。将Gen2 CLE用于脑肿瘤显微可视化和诊断的进一步验证正在进行中。

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2021.09

【Optiscan应用案例】4. 利用小型活体激光共聚焦内窥显微镜验证PARP1荧光在检测口腔上消化道上皮癌症中的有效性

在这项研究中,本文原作者报道了在动物模型和人类受试者中使用以前研究中描述的荧光标记的DNA repair enzyme poly(ADP–ribose)polymerase 1(PARP1)小分子抑制剂检测口腔、口咽和食道癌的有效性。作者发现,荧光造影剂局部施用或是静脉注射,可用于定量PARP1的表达水平,并检测小鼠、猪和人类新鲜生物样本的口腔、口咽和食管肿瘤情况。荧光PARP1抑制剂作为漱口液使用时,还可以检测出患者的口腔癌,并以95%以上的敏感性和特异性,来区分鉴别口腔肿瘤的新鲜活检样本以及手术切缘。PARP1抑制剂可作为上消化道上皮性癌变早期检测和手术切缘评估的基础。

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2021.09

【Optiscan应用案例】3. 共聚焦内窥镜用于小鼠口腔癌模型的荧光导向肿瘤切除术

本文的原作者证明了PARPi-FL,一种靶向PARP1 / 2酶的荧光PARP抑制剂,可以从肉眼可见级别和细胞分辨率上识别口腔癌并准确鉴定阳性切缘。 PARPi-FL还允许基于荧光热点来识别可疑的边缘,而在切缘阴性和对照组的舌头中则看不到荧光热点。 PARPi-FL能够进一步区分肿瘤与低程度的非典型增生。静脉注射PARPi-FL具有显著的临床转化潜力,可以帮助外科医生在活体层面评估口腔癌的边缘。

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2021.09

【Optiscan应用案例】2. 利用活体共聚焦成像系统对肝脏进行活体实时成像以显示肝细胞凋亡过程

本研究的目的是利用共聚焦显微镜观察活体啮齿动物肝细胞凋亡。在73只麻醉小鼠中,用CD95激动性抗体Jo2诱导肝细胞凋亡。用手持式共焦探头(FIVE1;Optiscan)对单个肝细胞进行长达240分钟的跟踪,分辨率为0.7μm(放大1000倍)。不同的荧光染色方法被用于细胞染色、血管和细胞屏障功能成像以及caspase活化显示。在保持肝脏灌注和组织完整性的同时,在体内可以观察到细胞凋亡的时间过程。与大多数离体研究相比,首次观察到的细胞肿胀与肝窦和肝细胞屏障功能的早期缺陷相吻合。胞浆小泡形成、核浓缩、细胞解体和巨噬细胞浸润被依次捕获。半胱氨酸天冬氨酸酶的标记使分子成像成为可能。我们的研究首次使我们能够在体内以高分辨率连续跟踪固体器官中细胞凋亡的不同形态、功能和分子特征。活体共聚焦显微镜可能是研究治疗干预对动物模型和人类细胞凋亡影响的有价值的工具。

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2021.09

【Optiscan应用案例】1. 利用小型化的激光共聚焦显微镜进行在体微血管和灌注的动态成像

精密光学切片可获得高分辨率的活体图像。连续切片观察脑微血管中白细胞与内皮细胞的相互作用。连续注射FITC标记的红细胞、FITC葡聚糖和吖啶后,发现微血栓形成。狼疮性肾炎MRL/lpr小鼠模型可见肾小球改变。

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2021.09